编者按:这个比较试验虽然是十年前就已经开展,其试验结果今天读来仍感觉有价值。当前养殖技术在进步,需要更进一步关注员工福利,因此提倡使用 二氯异氰脲酸钠烟熏剂作为熏蒸消毒剂,对人员危害小,而且安全。
在畜禽养殖中,尤其是禽类养殖中,养殖场的空气消毒是至关重要的环节。目前空气消毒的常见方法有甲醛-高锰酸钾熏蒸消毒、过氧乙酸熏蒸消毒及固体消毒剂烟熏消毒。三种空气消毒的消毒剂各有特色,不同的养殖场根据各自不同特点进行选择使用。如甲醛-高锰酸钾消毒是一种简单方便的消毒方法,只需混合即可反应,是养鸡场使用历史最长、最常见的一种空气消毒法。但甲醛具有“三致”作用,现在逐渐被大型养殖场淘汰。过氧乙酸是医院、冷库、养殖场、屠宰场常用的熏蒸用消毒剂,具有安全、高效、环保的特点,但过氧乙酸对金属物品具有腐蚀性。固体烟熏消毒剂常见的有含氯消毒剂配合引燃剂进行烟熏消毒,具有使用简单方便,消毒无死角及效率高等特点。为掌握三种常用熏蒸消毒法的杀菌效能,科学指导用户选择熏蒸消毒方法,现将三种消毒方法进行对比试验,以供养殖场参考。
1、材料
1.1试验样品:甲醛40%、高锰酸钾 ;过氧乙酸溶液( 含量:18%,由湖南五指峰生化公司提供 );二氯异氰脲酸钠烟熏剂(商品名:消毒威,含量:40%, 由湖南五指峰生化有限公司提供)
1.2试验菌液:大肠埃希氏菌(8099)、多杀性巴氏杆菌(禽株)、金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、蜡状杆菌芽孢(SSI Cl/1)。(均购自中国兽药监察所)。将菌液活化、培养、计数,制成平板(菌落数为10 6 ~10 7 CFU/mL )。
2、方法(参照《兽用消毒剂鉴定技术规范》)
试验场地:选三个独立密闭房间,房间体积为16×3×3.8+12×1.4×3.8=246m 3 。房间每隔4米随机选择4个点各放置一组大肠杆菌、巴氏杆菌、金葡球菌、蜡状杆菌芽孢平板,共16组合计64个平板。
试验步骤:
(1)甲醛熏蒸法:每立方米福尔马林(甲醛溶液)20毫升+高锰酸钾10克,需甲醛4920毫升、高锰酸钾2460克。将福尔马林与高锰酸钾混合开始熏蒸,隔30分钟、1小时、4小时、8小时从每个点各取出一组样品,放生化培养箱中培养(37℃),24小时后测活菌数。
(2)过氧乙酸熏蒸法:每立方米用15毫升过氧乙酸熏蒸,需过氧乙酸3690毫升。将过氧乙酸放入容器中加热熏蒸,隔30分钟、1小时、4小时、8小时从每个点各取出一组样品,放生化培养箱中培养(37℃),24小时后测活菌数。
(3)消毒威熏蒸法:点火开始烟熏后,隔30分钟、1小时、4小时、8小时从每个点各取出一组样品,放生化培养箱中培养(37℃),24小时后测活菌数(烟熏用量:5g/m 3 ,共1238g)。
3、结果
表1:甲醛熏蒸试验
细菌 |
熏蒸时间 |
杀菌结果(菌落数) |
对照组 |
杀菌率(%) |
|||
大肠杆菌 |
30min |
- |
- |
- |
- |
1.03×10 4 |
0 |
1h |
82137 |
46139 |
57142 |
47238 |
43.53 |
||
4h |
33637 |
29654 |
30774 |
40123 |
67.43 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
巴氏杆菌 |
30min |
- |
- |
- |
- |
6.30×10 4 |
0 |
1h |
21.45 |
||||||
4h |
54.89 |
||||||
8h |
362 |
197 |
328 |
373 |
99.95 |
||
金葡球菌 |
30min |
- |
- |
- |
- |
1.50×10 4 |
0 |
1h |
87432 |
73650 |
37.5 |
||||
4h |
46972 |
37945 |
46513 |
41370 |
71.20 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
蜡状杆菌芽孢 |
30min |
- |
- |
- |
- |
5.80×10 4 |
0 |
1h |
- |
- |
- |
- |
0 |
||
4h |
- |
- |
- |
- |
0 |
||
8h |
- |
- |
- |
- |
0 |
表2:过氧乙酸熏蒸试验
细菌 |
熏蒸时间 |
杀菌结果(菌落数) |
对照组 |
杀菌率(%) |
|||
大肠杆菌 |
30min |
19134 |
17530 |
16393 |
18219 |
1.03×10 4 |
82.7 |
1h |
159 |
54 |
62 |
97 |
99.91 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
巴氏杆菌 |
30min |
93578 |
6.30×10 4 |
79.34 |
|||
1h |
375 |
79 |
135 |
167 |
99.97 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
金葡球菌 |
30min |
26611 |
17635 |
19340 |
11654 |
1.50×10 4 |
87.46 |
1h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
蜡状杆菌芽孢 |
30min |
84171 |
79342 |
77650 |
87349 |
5.80×10 4 |
85.84 |
1h |
390 |
299 |
310 |
393 |
99.94 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
表3:消毒威熏蒸试验
细菌 |
熏蒸时间 |
杀菌结果(菌落数) |
对照组 |
杀菌率(%) |
|||
大肠杆菌 |
30min |
889 |
1170 |
1865 |
1390 |
1.03×10 4 |
98.7 |
1h |
64 |
59 |
16 |
46 |
99.95 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
巴氏杆菌 |
30min |
2530 |
2858 |
2776 |
3420 |
6.30×10 4 |
99.50 |
1h |
86 |
197 |
60 |
600 |
99.96 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
金葡球菌 |
30min |
2720 |
3680 |
3374 |
3967 |
1.50×10 4 |
97.71 |
1h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
蜡状杆菌芽孢 |
30min |
2360 |
1893 |
2578 |
3237 |
5.80×10 4 |
99.57 |
1h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
4h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||
8h |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
4、结论
甲醛在熏蒸消毒8小时后对大肠杆菌、巴氏杆菌、金葡球菌、蜡状杆菌芽孢的杀灭率分别为100%、99.95%、100%、0;过氧乙酸在熏蒸消毒1小时后对大肠杆菌、巴氏杆菌、金葡球菌、蜡状杆菌芽孢的杀灭率分别为99.91%、99.97%、100%、99.94%;消毒威在熏蒸1小时后对大肠杆菌、巴氏杆菌、金葡球菌、蜡状杆菌芽孢的杀灭率分别为99.95%、99.96%、100%、100%。
5、说明
5.1 依据《现代药理实验方法》的体外杀菌实验的菌落计数方法,低于5个菌落的视同为杀菌完全;
5.2 依据《兽用消毒剂鉴定技术规范》中的判断标准,杀菌率达到99.9%以上即可认为其消毒效能符合规范;
5.3 本实验结果只对本次送检样品负责。
6、分析
通过本次试验对三种消毒剂熏蒸消毒的杀菌效能结果进行评价,甲醛熏蒸法在8小时内对细菌的杀菌效能不理想,在熏蒸8小时后杀菌完全,但甲醛对芽孢无杀菌作用;过氧乙酸和 二氯异氰脲酸钠在熏蒸消毒 1小时后即可达到完全消毒效果(99.9%),具有高效、速效的特点,是当前理想的熏蒸消毒方法,可广泛应用于畜禽养殖的各种密闭环境条件消毒。