原文名:Common Mistakes in Interpretation ofPopulation Serology
著者:Gregory W. Stevenson
如何有效利用群体血清学数据是很复杂的,需要预防兽医对体液免疫应答、血清学试验类型及其总体敏感性和特异性、猪群中特异性传染因素的流行病学和统计学有基本了解。过去的 10 年,在杂志和会议论文集中有关这些论题的综述性文章超过 40 篇之多。最全面的七个方面列于诸多文献中,以下是核心概念内容大纲。
错误 1:缺乏对基本概念理解,试图应用/解释血清学数据
血清学试验仅测试体内循环抗体,并不能测定细胞介导的免疫;
主要的循环抗体有两类:即 IgG 和 IgM;
IgM 抗体出现早,达到峰值早,消失相对快;
IgG 抗体出现要迟,达到峰值也晚,在血清中存在的时间要长得多;
猪只通过免疫接种或感染后,初次与抗原接触产生原发性应答反应;
与各种抗原再次接触后导致更迅速和持续时间更长的明显二次应答反应;
但不是所有类型的血清学试验均能同样地测定 IgG 和 IgM 抗体;
在检测 IgM 和 IgG 抗体类别中,选择性血清学试验的效力
IgM
IgG
凝集反应
补体结合反应
病毒中和试验
沉淀反应
血凝抑制试验
ELISA**
免疫荧光抗体**
**试验可以设计,以检测一种或两种类型。
检测主要是 IgM 的试验中出现较高的效价,说明新近感染或免疫接种。由于 IgG 的持续期长,在检测 IgG 的试验中出现较高效价时,就不能肯定得出同样的结论。
某些试验的设计会影响特异性而不是简单地仅检测抗体的类型;由于这个缘故,人们应当总是尽量了解所用的每种血清学试验在特异性和敏感性方面的实际局限性。例如,检查猪肺炎支原体的DAKO ELISA 试验采用针对猪肺炎支原体的单个蛋白表位的单克隆抗体,为了检测猪肺炎支原体野外菌株感染的抗体,而不检测其它密切相关的非病原性支原体如絮状支原体的抗体。遗憾地是,有些预防肺炎支原体非常有效的疫苗,诱发在本试验中的靶表位的血清学应答并不高,这意味着DAKO 试验在许多疫苗免疫的动物中为阴性,而吐温 20 ELISA 对猪肺炎支原体仍为阳性。因此, DAKO 试验用于监测猪肺炎支原体野外菌株感染是理想的,但无法确定用相同疫苗免疫接种的反应;
在动物群体中,不同个体之间的体液免疫应答强度有生物学的差异,就是说对相同抗原刺激产生的最高效价并不相同。
试验敏感性是指检测具有特异性抗体(真正阳性)动物时试验的效力。就是说具有高度敏感性试验,很少有假阴性;
试验特异性是指检测缺乏特异性抗体(真正阴性)动物时试验的效力。就是说具有高度特异性试验,很少有假阳性;
试验特异性和敏感性是相互矛盾的,就是说高度敏感性试验常缺乏特异性而高度特异性试验常缺乏敏感性。
许多血清学试验随时间不同,敏感性方面具有内在变异性,因此,要比较多份血清样本的效价话,应在同一实验室、同一天中处理同一批试验的样品。
一种阳性的试验能检测特异性抗体并且能提出以前或目前的感染、以往的免疫接种,没有非特异性反应(假阳性)或与抗原性有关微生物的交叉反应;
一种阴性的试验表明特异性抗体低于试验敏感性检测的水平,一个阴性试验并不总是表明缺乏感染或未有以往感染。
新近感染的动物可能为血清学阴性,因为它们还没有发生血清转阳。对一个敏感的试验,例如 IDEXX 公司用于检测 PRRS 的ELISA(感染后 9 天才能检出血清转阳)就会出现这种情况。对一个敏感性较低的试验,如检测猪肺炎支原体的吐温 20-ELISA,感染后至少2~3 周才出现血清转阳。
有些传染因子的携带者也会发生血清转阳,在粘膜表面的细菌感染可能不会诱导某些动物的体液免疫应答,如胸膜肺炎放线杆菌的低水平带菌猪。伪狂犬病毒和其它疱疹病毒可以发生潜伏,在体液抗体衰减后,潜伏带菌猪可能会血清转阴。由某些因子引起的子宫内感染,可以导致终生持续性感染和免疫耐受。
(未完待续)