摘要：2014年1月，在美国首次发现猪流行性腹泻(PED)约9个月后，加拿大安大略省西南部的一个猪群确诊了加拿大首个PED病例。对安大略省PED首个病例和后续10个病例进行流行病学调查表明，饲料是一个共同的危险因素。因此，通过RT-PCR检测了若干批饲料和喷雾干燥猪血浆蛋白(SDPP)是否存在PEDV基因组。其中一些检测呈阳性，支持了受到污染饲料可能是将PEDV引入加拿大的观点。生物测定实验表明，其中3个PEDV阳性的SDPP样本(来自一个批次)和2个PEDV阳性的饲料样本添加了该SDPP。3周龄仔猪口服接种，虽然接种后仔猪PEDV排毒不明显，但SDPP接种仔猪PEDV排毒量较高，持续时间≥9d。尽管生物测定实验中，经过测试的PEDV基因组阳性饲料没有导致明显的仔猪感染，但不排除被污染的饲料是引入的一个可能来源，因为许多其他变量可能发挥作用。
表1：实验组
注释：
Experimental group：实验组
Inoculum：接种
Animal numbers：猪只数量
PEDV N gene RRT-PCR results：PEDV N基因RT-PCR结果
PEDV S gene RT-PCR results：PEDV S基因RT-PCR结果
Negative control：阴性对照
Positive control：阳性对照
PEDV positive colon emulsion：PEDV阳性结肠乳剂
Spray-dried plasma：喷雾干燥血浆蛋白
Feed：饲料
表2：生物测定实验
注释：
Experimental group：实验组
Inoculum：接种
Animal numbers：猪只数量
Negative control：阴性对照
Feed group：饲料组
图1：通过对猪直肠拭子样本进行N基因RT-PCR检测，得到猪只个体PEDV排毒点状图。(a)阳性对照组猪只接种PEDV阳性结肠混悬液。(b)喷雾干燥血浆蛋白组。(c)阴性对照猪与阳性对照猪接种后7d开始接触。(d)阴性对照猪从接种后7d开始与喷雾干燥血浆接种猪接触。
图2：仔猪S蛋白基因序列比对。NCFAD 2014-022与测序的5个SDPP样本序列相同。血浆#21-22、#25-26、#29-30、#32来SDPP接种的仔猪。NCFAD2014-18#1-10是安大略省首次发病后的10个病例。NCFAD 2014-35是来自魁北克的一个病例。MAFRI来自马尼托巴省的一个病例，NCFAD 2014-41来自马尼托巴省的一个环境样本。Colorado(KF272920)和Indiana(KF452323)为美国PEDV分离株。
图3：回肠组织病理学及免疫组化检查结果。(a)绒毛萎缩，粘膜下水肿(*)，淋巴管扩张(箭头)。(b)固有层内单核炎症细胞增多(*)。可见立方体表面上皮细胞，有时呈空泡状(箭头所示)。(c)表面上皮细胞免疫染色阳性(箭头)。(d)免疫染色主要在刷状缘可见。(e-f)阳性对照猪接触后5天。(e)绒毛缩短，腔内有大量坏死碎片。(f)表面肠细胞呈阳性免疫染色。(g-h)阴性对照猪回肠。(g)轻度炎症，绒毛缩短。(h)免疫组化未检测到PEDV抗原。
