净化蓝耳,是不少养猪人的终极梦想,而蓝耳病也被农业农村部列为种猪场必须净化的疾病。随着国内猪场生物安全防控的提升,以及蓝耳病毒的自身特性为实施净化蓝耳提供了可能。
1、封群原理
封群期间“鼓励”PRRS病毒感染,消除易感动物后让病毒自行死亡。PRRS病毒感染会在猪群中逐渐消失。尽管种猪会较长时间带毒和在一定时期内散毒,但是最终PRRS病毒会从猪体内被清除。利用这些特性实施PRRSV清除是经过性,不用采取清群即可清除PRRSV。特别适合目前4周批生产的种猪场。
2、猪场蓝耳净化的优势
事先要对整个配种、后备选留进行良好规划,在封群期间可适当放宽淘汰母猪的条件,在整个封群过程中对生产几乎没有不良影响,总产活仔数等生产指标会有一定程度的提高。无需通过清群的办法就可以预防母猪蓝耳病(PRRS)的感染,分娩率、断奶头数、断奶均重、保育期死亡率等指标也会有改善。封群净化适用于两点式生产的母猪场,不适用于母猪、保育、育肥在一体的单点式猪场。
3 、实验室检测手段
酶联免疫吸附测定法(ELISA)和聚合酶链式反应(PCR)结合,ELISA主要用于抗体检测,PCR方法主要用于病毒检验,作为确定阴性的切实方法。计划使用“哨兵”猪的检测确认阴性。
4 、具体方法与步骤
1)在进行封场操作前,须获得生产数据,包括封场前一年的各批次断奶头数、批次配种数、分娩率、窝产活仔数、保育期死亡率,以作为与PCR检测结果进行相关分析,同时作为封场计划的依据;
2)做好封场计划,包括确定封场日期、时间、配种计划、后备猪的场内培育计划、猪群大小的维持。
3)做好180~260天为周期的配种计划,在该计划指引下,计算好后备种猪的需求数量,做好场内培育种猪的规划,在计划开始前1个月将所需的后备种猪在封群前一次性引入到猪场内进行培育,确保在整个封群过程中不会出现后备猪断档。
4)感染用血清的制备与使用∶将样猪(进群前是阴性的后备猪)用双节管采血(采血量需要确认);分离血清,一半的血清进行PCR送检、另外一半保存于猪场冰箱内;通过PCR确定PRRS感染阳性后(必须同时确认猪瘟、伪狂犬等阴性),留样部分用于接种阴性后备猪(接种剂量依照检测结果而定)。
5)接种后的第7~10天,30头接种的后备猪的血液,使用血清分离管收集,每头猪6毫升;2000转离心30分钟,在冰箱中等待凝血;将所有血清倒入干净、灭菌瓶中,约100毫升。将血清按2毫升每管,分装于2毫升的低温储藏管中;送入液氮罐中保存,将其中1管从液氮罐中取出后送检。检测项目有,将经过1次冻融的血清进行PCR,检测PRRS病毒阳性;对PRRS病毒的毒株进行确认;进行PRRS的定量PCR,按照其半数细胞感染量计算。每2个月抽取1管,重复上述3种检测。
6)依照测量病毒浓度,计算出稀释用生理盐水量,使之终浓度为每毫升100倍组织半数感染量;将管取出后在手掌心解冻1~2分钟;倒入计算好量的生理盐水中,每200毫升加入400万单位青霉素;每半个小时注射1次,每头猪2毫升,其病毒剂量为200倍的组织半数感染量。
7)整个封群持续期6~9个月,期间除预先选定的后备猪外,不再把任何后备猪引入猪群;同时做好封群开始后每批次的数据收集与获得,包括∶每批次断奶头数、批次配种数、分娩率、窝产活仔数、保育期死亡率。
8)此后对每批断奶猪进行采血,每次采血20头、每4头混合为1 个检验样品,用混合的血清进行PCR检测,确认PRRS阴性。在连续2次采血经PCR检测均为阴性,可以确认猪群呈现“稳定”状态,猪群呈现稳定状态并达到封场6个月时间者,就可以恢复正常生产。
9)猪群中放入“哨兵”猪,通过对“哨兵”猪的状况,确认封群的效果,即PRRS是否真的被清除。恢复正常生产后应坚持引种PRRS阴性种猪。
5 配套生物安全措施
1)保证提供的精液全部为阴性。
2)运输工具应专用,阴性场和阳性场的车辆决不能混用;
3)车辆用红外线烘干消毒。
4)所有进场器械均为双层封袋,进场前去掉首层封袋,使用前再去除内层封袋。
5)禁止外来人员进入猪场。
6)所有疫苗、药品均送到指定地点,杜绝多点存放。
附件:感染蓝耳后的时间轴(McCaw.2006)
以下所列的时间轴是单个猪清除蓝耳病毒的多个事件,要把蓝耳病毒从体内清除出去,需要花很多时间建立完全免疫力
PRRSV感染后的时间
10—30d 病毒血症(从血液可以分离到病毒),强烈抗体反应
20—30d 最早检测到中和抗体
60d+ 血液中的中和抗体达到顶峰
100—150d 扁桃体/淋巴结变成蓝耳病毒阴性(在保育舍发生感染),许多猪变成蓝耳抗体阴性(<0.4S/P ratio),但血清中和抗体还是阳性
150d++ 扁桃体/淋巴结变成蓝耳病毒阴性
200d 单个猪场封群所需时间