2010 年，美国医学研究所审查了当前的文献，将 400 IU/天的估计平均需求量更改为美国 600-800 IU/天的推荐膳食允许量 (RDA)(IOM，2010)。这是在假设由于皮肤癌问题，阳光照射最少的情况下完成的。为此，很少有天然食物含有显着浓度的维生素 D 来满足新推荐的膳食标准，这需要强化饮食或含有维生素 D 的特定食物以满足当前和未来的建议。
因此，重要的是找到替代食物来增加饮食中维生素 D 的每日摄入量，以维持这种重要营养素的高循环浓度。
2011 年，美国农业部对食用鸡蛋维生素 D 含量进行了调查，并将该值更新为 40 IU/鸡蛋，反映了为提高蛋鸡骨骼和蛋壳质量而饲喂的维生素 D 量有所增加。尽管这表明鸡蛋维生素 D 含量大幅增加，但报告的原始数据表明，维生素 D 的商业含量超过 400 IU/鸡蛋，这表明由于膳食补充和脂质和脂溶性分子的有效转移，鸡蛋维生素 D 含量发生了变化从母鸡到鸡蛋。
假设和项目目标
给蛋鸡喂食增加浓度的补充维生素 D 会增加蛋中维生素 D 的浓度。这项拟议研究的目的是确定与鸡蛋中维生素 D 含量峰值相对应的补充膳食维生素 D 的阈值。虽然 40.000 IU/kg 已被证明喂给蛋鸡是安全的，但蛋鸡日粮中补充 400.000 IU/kg 已被证明会对健康和性能产生负面影响。这项研究旨在评估几种低于 40.000 安全剂量的剂量和一种高于安全剂量但仍远低于已知毒性剂量 400.000 IU/kg 的剂量。
材料和方法
表 1概述了处理设计。实验日粮将连续喂给三只母鸡的三个围栏，每个围栏允许八个重复组，每次处理总共有 72 只母鸡。由于成本、向鸡蛋的转移以及与其他维生素 D 代谢物的毒性比较，选择维生素 D 3作为膳食补充维生素 D 的形式。
在产蛋周期开始时将实验日粮喂给蛋鸡，并持续整个周期，大约 18 至 54 周。母鸡管理遵循 UEP 指南(UEP，2002)，并且根据饲养员的建议制定饮食。实验日粮每两周混合一次，以尽量减少补充维生素 D 因饲料储存而导致的降解。每天输送饲料，每周测定饲料残留。计算采食量和转化率(g 蛋/g 采食量)。每天记录母鸡死亡率。
每天收集鸡蛋并记录生产性能。在前四个星期 (19-23)，每周连续两天保存鸡蛋;在接下来的 10 周 23-33 中，每两周连续两天;在实验的剩余时间 (32-58) 中，每四个星期连续两天。对保存的鸡蛋进行称重以确定鸡蛋的大小和生产的质量。每个实验处理 16 个鸡蛋(每个重复组两个)被打碎和分离以确定蛋壳、蛋黄和白蛋白的重量。汇集蛋黄以确定总脂质、磷脂、脂肪酸组成和总不皂化物。汇集蛋黄以产生四个重复样品，用于通过 HPLC 测定维生素 D。使用蛋壳来确定蛋壳厚度并测量哈夫单位，并在色扇上对蛋黄颜色进行评分。剩余的鸡蛋用于测定蛋黄的物理和功能特性，包括生蛋黄的粘度和乳化参数。
在实验结束时，目视检查所有母鸡的龙骨完整性和软组织钙化，以确定长期补充维生素 D 对骨骼和软组织完整性的影响。从每个重复组的三只蛋鸡中收集右胫骨，以确定无脂胫骨灰分作为一般骨骼健康和 Ca 和 P 状态的指标。
使用重复测量的 ANOVA 分析性能数据和鸡蛋重量、鸡蛋成分重量、哈夫单位和蛋黄颜色评分的统计数据。每两周用新的饮食混合分析性能数据，并在以 1、2 或 4 周的间隔收集鸡蛋时分析鸡蛋数据。随着时间的推移没有相互作用，因此呈现了主要影响。如果检测到显着性 (P < 0.05)，则采用 Tukey 真实显着性检验来分离处理方法。使用 ANOVA 分析鸡蛋质量特征和维生素 D 含量和转移率。
结果与讨论
观察 19 至 58 周的性能数据表明，不同浓度的补充维生素 D 之间没有差异。40 周期间的产蛋率在 91.4 和 93.1% 之间，母鸡饲喂的鸡只和维生素 D 之间没有任何显着差异补充 D 的禽类，尽管补充维生素 D 的禽类之间存在一些不一致的差异。
采食量再次显示对照饲料和补充维生素 D 的饲料之间没有显着差异，总采食量为每只母鸡每天 91.8 至 99.2 克。日产蛋量或总饲料效率(克蛋/千克采食量)没有差异。这些数据与之前的数据一致，之前的数据报告了对照喂养的家禽和补充了 5.000 至 15.000 IU/kg 维生素 D 的家禽在生产性能上没有差异。
表3). 与总蛋重一样，处理之间的蛋白重量没有差异，但与对照组(2.200 IU/kg)和 102.200 IU/kg 处理相比，接受 24.700 IU/kg 处理的鸡的蛋黄重量显着增加。补充 24.700 和 102.200 IU/kg 的母鸡的蛋壳重量存在显着差异，但实验处理与对照喂养鸡的蛋没有差异。
这些结果与 Browning 和 Cowienson(2014 年)大体一致，其中高达 10.000 IU/kg 的维生素 D 并未显着改变蛋重、破壳强度或蛋黄重量。Haugh 单位，蛋白质量的测量值没有因维生素 D 处理而显着改变，但蛋黄颜色随着 102.200 IU/kg 维生素 D 处理而显着增加(表 3 )。蛋黄颜色是第一个测量到的反应，其中最高浓度的维生素 D 可能会改变反应，但问题仍然存在，蛋黄颜色的这种适度但显着的差异是否表明负面表现?
与 Haugh 单位一样，蛋黄水分含量、不皂化物、粘度和乳化特性因母鸡日粮维生素 D 处理而无显着差异(表 4). 乳液和乳化数据在文献中得到支持，因为 Mattila 和同事 (2003) 没有显示这些测量与全蛋有任何差异。在为期 40 周的实验结束时，收集母鸡胫骨用于脱脂灰分测定。与表现一样，我们补充膳食维生素 D 对脱脂胫骨灰没有影响，所有骨骼看起来都正常和健康。
所提供的性能和鸡蛋质量数据可能表明，高达 102.200 IU/kg 的维生素 D 对蛋鸡来说是安全有效的饲料，但在得出结论之前考虑维生素 D 的一般代谢和调节也很重要。
将维生素 D 喂给蛋鸡 40 周后，蛋黄维生素 D 含量从 9.700 IU/kg 线性增加到 24.700 IU/kg 饲料喂养的鸡群(图 1)，验证了之前的数据并将响应范围扩大到几乎25.000 国际单位/公斤。但是观察维生素 D 从饮食中转移到 102.200 IU/kg 处理的蛋黄很明显，在这些高浓度的饮食维生素 D 中，比任何其他处理更多的维生素 D 被转移到蛋黄中。当考虑五种饮食治疗的维生素 D 转移率时，这一点就非常清楚了(图 2)。
在对照鸡蛋中注意到最低的转移率是大约 5%，9.700 至 24.700 IU/kg 处理导致转移率显着增加，但控制在 8% 至 9%。一旦饲喂了 102.200 IU/kg 的日粮，转移率就不受控制，大约有 25% 到 30% 的维生素 D 从日粮转移到蛋黄中。维生素 D 代谢的这种分解确实表明至少是毒性的开始阶段，尽管在为期 40 周的实验中表现没有受到负面影响。
这些结果增加了我们对维生素 D 毒性数据的估计，并有助于更好地定义蛋鸡的这些比率。目前，在没有明显毒性作用的情况下饲喂的维生素 D 的最高浓度为 40.000 IU/kg 饲料（Morrisey 等人，1977 年），此处提供的其余研究报告和数据均同意低于 40.000 IU/kg 的浓度是对蛋鸡无毒。几乎没有收集到高于此阈值的数据点，但 Morrisey 及其同事 (1977) 确实评估了 400.000 IU/kg 维生素 D 毒性，包括软组织钙化。
目前的数据表明，由于模型无法控制膳食维生素 D 转移到蛋黄中，102.200 开始变得有毒。因此，此时我们可以得出结论，40.000 IU 维生素 D/kg 饲料或更少对蛋鸡来说是安全和可耐受的，但日粮浓度超过 100.000 就会对母鸡产生毒性。本文件中提供的数据基于成年动物的短期或长期喂养，并不反映在后备母鸡饲养阶段限制互操作的高维生素 D 喂养应用。更好地了解在蛋鸡的整个生命周期(而不仅仅是成年产蛋阶段)饲喂较高维生素 D 的长期生长、性能和健康影响将很有趣。
