01 ASFV在不同温度下的研究
有许多研究已经证明了非洲猪瘟病毒在土壤、饲料、猪肉、粪便等基质中的存活情况。此前,有研究发现,在实验条件下,感染剂量的非洲猪瘟病毒可能存在于液体环境中,但非洲猪瘟病毒在真实水体环境中的存活能力,尚未得到很好的研究。
最近,英国布莱特研究所的研究人员对非洲猪瘟病毒在不同温度条件下,在河水中的稳定性进行了评估。研究人员在泰晤士河及其主要支流沿岸不同地点采集水样,并将ASFV BA71V毒株(基因?型)毒株接种到水样中,分别在4℃,15℃和21℃下进行培养,并在培养第0、7、14、21和42天后,使用空斑测定法计算各样本中的病毒滴度。
结果发现,在4℃的环境温度下培养21天,各组的病毒滴度没有显着差异,但随着培养时间延长和培养温度的升高,病毒的稳定性和感染性都将降低。与蒸馏水对照组相比,环境温度升高到15℃和21℃时,天然河水样本中的病毒滴度,下降更为明显。平均而言,ASFV BA71V毒株在4℃环境温度下,培养42天,仍保持传染性,但温度升高至15℃和21℃时,病毒的稳定性下降,分别缩短为28天和14天。病毒在15°C和21°C下孵育28天后,滴度会出现4log10的降低,此时病毒被认为已失去传染性。
图1 泰晤士流域地图,采样点位置
图2 VERO病毒接种试验
图3 病毒在4℃、15℃和21℃水样中随时间的滴度变化
02 60℃加热处理2小时,非洲猪瘟病毒依然存活且发生致弱
发表于《Viruses》杂志上的一篇文章表明:对格鲁吉亚2型ASFV在60℃环境下加热2小时后,在肺泡巨噬细胞上无法培养出病毒,但将加热后的病毒接种猪只后,病毒竟然复活了,但复活后的病毒的毒力变弱了。
原文表示,在尝试通过热处理灭活Georgia 2007/1菌株时,研究团队偶然产生了一种名为ASFV-989的减毒株。与Georgia相比,ASFV-989毒株基因组在MGF 505/360的5'端编码区缺失了7458个核苷酸,这使得DIVA PCR系统的建立成为可能。在猪肺泡巨噬细胞中,ASFV-989和Georgia株的复制动力学相同。在体内,接种了ASFV-989毒株的无特异性病原体(SPF)猪,无论是肌肉注射还是口鼻注射,都表现出短暂的高温和轻微的生长性能下降。
用ASFV-989株感染动物的病毒血症比接种格鲁吉亚株低100~1000倍,并产生快速的抗体和细胞介导反应。在接种ASFV-989疫苗的猪中,格鲁吉亚毒株攻毒2或4周后,没有记录任何症状,也没有检测到攻毒株的病毒血症。这些结果表明,ASFV-989毒株是一种有希望的非转基因候选疫苗,可用于肌肉注射或口鼻注射。