裸藻源β-1,3-葡聚糖是被广泛认可的高效免疫调节剂，它可以提升动物机体免疫力，在人和动物中都有很好的推广和应用，研究成果也在不断推陈出新。2022年底在国际知名兽医杂志Open Veterinary Journal发表了一篇其在猪上的研究成果，题目和作者见图1。题目简单地说明了β-葡聚糖对非洲猪瘟病毒的影响，从文中材料与方法可知其葡聚糖为线性裸藻源β-1,3-葡聚糖。本篇译文将挑选几项重点研究结果，以飨读者。

图1 β-葡聚糖的免疫效果研究发表文章题目截图

01目的

在这项研究中，作者以猪肺泡巨噬细胞（PAM）模型研究裸藻源β-1,3-葡聚糖对PAM活力的作用效果。

02材料与方法

为评估裸藻源β-1,3-葡聚糖对猪肺泡巨噬细胞的潜在影响， 本研究采用MTT比色法评估裸藻源β-1,3-葡聚糖对免疫细胞增殖的影响。

收集猪肺泡巨噬细胞，通过血细胞计数器计数，使用培养基对原代肺泡巨噬细胞进行稀释，使细胞浓度为106个/ml。

将该细胞悬液用100μl移液器均匀分配到96孔微量滴定板中，并在5%CO2中孵育24小时，培养温度为37°C。

用0μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖(对照组)、30μg/ml 裸藻源β-1,3-葡聚糖和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖预处理肺泡巨噬细胞2小时, 然后使用103HAD50/ml的越南非洲猪瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒。

在5%CO2、37°C条件下孵育24、48、72、96和120小时，使用MTT试剂盒测定细胞增殖结果，通过实时荧光定量PCR进一步检测裸藻源β-1,3-葡聚糖对越南分离的田间ASFV毒株的潜在影响。

使用夹心酶联免疫吸附测定法检测裸藻源β-1,3-葡聚糖诱导的干扰素（IFN）-α和白细胞介素（IL）-6的浓度。

03结果与讨论

3.1裸藻源β-1,3-葡聚糖能促进猪肺泡巨噬细胞的活力

用30和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖预处理猪肺泡巨噬细胞2小时，对照组未加入裸藻源β-1,3-葡聚糖处理，然后使用103HAD50/ml的越南非洲猪瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒，在5%CO2 在37°C条件下孵育24、48、72、96和120小时，用MTT试剂盒测定细胞增殖，结果如图2所示。

图2 MTT比色法测定β-1,3-葡聚糖对PAM细胞活力的影响

图表来源：Open Veterinary Journal,2022

结果表明，与对照组相比，30或50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖处理组能够以剂量依赖性方式提高细胞存活率，并且这些效果一直持续到120小时。

3.2裸藻源β-1,3-葡聚糖对猪肺泡巨噬细胞有免疫增强作用

使用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖预处理 PAM 2小时后，暴露于103HAD50/ml ASFV 持续 12、24小时。

收集上清液，然后对ASFV的DNA p72基因进行实时PCR扩增，检测裸藻源β-1,3-葡聚糖处理的PAM中病毒DNA的拷贝数，结果如图3所示。

与对照组相比，使用裸藻源β-1,3-葡聚糖处理的PAM感染12小时后的病毒滴度显着降低。

图3 裸藻源β-1,3-葡聚糖对PAM抗病毒活性的影响

图表来源：Open Veterinary Journal,2022

3.3高剂量的裸藻源β-1,3-葡聚糖显着增强了病毒感染后PAM中IFN-α和IL-6的产生

用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖预处理PAM 2小时并设立对照组，然后暴露于103HAD50/ml ASFV病毒条件下，持续12小时（A、C）和24小时（B、D）产生的细胞因子IFN-α和IL-6如图4。

图4 裸藻源β-1,3-葡聚糖处理PAM后感染ASFV产生细胞因子的浓度对比

备注:

A:12小时IFNα浓度（pg/mL）

B:24小时IFNα浓度（pg/mL）

C:12小时IL-6浓度（pg/mL）

D:24小时IL-6浓度（pg/mL）

图表来源：Open Veterinary Journal,2022

与对照组相比，裸藻源β-1,3-葡聚糖（30μg/ml和50 μg/ml）两个处理组在12h时IFN-α和IL-6的产生均显着增加，并持续到24h。

高剂量的裸藻源β-1,3-葡聚糖显着增强了感染后PAM中IFN-α和IL-6的产生。

04结论

本研究结果揭示了裸藻源β-1,3-葡聚糖对ASFV的影响，其作用机制可能与细胞免疫反应有关，且对裸藻源β-1,3-葡聚糖存在剂量依赖作用。

此外，研究还表明，裸藻源β-1,3-葡聚糖可以显著提升宿主免疫力。