“相比于猪瘟、蓝耳净化，真正有措施、有方案、有手段的还是猪伪狂犬病净化。如今万事俱备，做就行。”10月20日，国家兽用药品工程技术研究中心主任田克恭在第八届李曼中国养猪大会上介绍了《猪伪狂犬病防控与净化新技术》。

国家兽用药品工程技术研究中心主任田克恭

7年精心打磨，变异株猪伪狂犬灭活苗为净化助力

2011年底猪伪狂犬病毒变异，我国许多免疫猪场相继发病，大部分发病场猪群出现典型伪狂犬病临床症状，gE抗体阳性率接近100%。部分猪场仅发现gE抗体阳性率上升但未见发病；gB抗体阳性率偏低。感染猪伪狂犬病的猪解剖可见脾脏梗死、脑补淤血、肺脏实变等。

猪只感染变异株伪狂犬病毒后，给猪只免疫原有的伪狂犬疫苗还能不能起到很好地保护作用？田克恭表示，经典毒株疫苗不能完全保护变异毒株。伪狂犬的变异毒株出现后，几乎再也见不到伪狂犬经典野毒。

据了解，2012年1月国家兽用药品工程技术研究中心成功分离出猪伪狂犬变异毒株—HN1201。随后，田克恭率领团队进行研发，利用基因重组技术，构建出gE基因缺失的灭活疫苗株（HN1201-ΔgE株）。2015年4月21日，该疫苗获得中国人民共和国农业部颁发的临床试验批件；2019年1月22日，获得农业农村部颁发的新兽药注册证书；2019年4月15日，获得农业农村部颁发的兽药产品批准文号批号。经过七年时间的精心打磨，国内首个针对猪伪狂犬病变异毒株的灭活疫苗——普伪净正式诞生。

会议现场

普伪净对猪伪狂变异和经典毒株均可完全保护

“缺gE的目的是为了鉴别诊断，研究灭活苗的目的就是为了净化。”田克恭表示，病毒变异后，做成灭活苗产生中和抗体非常高。普伪净的诞生为猪伪狂犬病净化增加砝码。

据田克恭介绍，该疫苗具有四大特点：

1、国内第一个针对猪伪狂犬病变异株的灭活疫苗，对猪伪狂犬病变异毒株和经典毒株均可产生完全的保护力；

2、国内第一个采用基因工程手段缺失gE基因的灭活疫苗，有利于猪伪狂犬病的净化和根除；

3、疫苗免疫后2周即可产生高水平的中和抗体，且抗体持续时间至少4个月以上，可有效阻止野毒感染及gE抗体转阳；

4、采用进口双相复乳佐剂，安全性高无免疫副反应。

猪伪狂犬灭活疫苗（HN1201-△gE株）与同类产品（包括进口的、国产的，灭活苗与活疫苗）相比较，无论是gB抗体转阳的时间，还是抗体出现的高低，持续时间长短，都明显优于原来经典毒株的活苗和灭活苗。PRV灭活疫苗（HN1201-△gE株）免疫组攻毒后体温稳定，无明显升高。

PRV gE/gD抗体联检生物芯片提高效率4-8倍

要想净化猪伪狂犬病，除了拥有好的疫苗外，还需要免疫效果评价的试剂盒和感染免疫鉴别的试剂盒。据田克恭介绍，普泰生物试剂盒的特异性、敏感性与稳定性值得信赖。在检测gE抗体方面，普泰生物与爱德士作对比实验，结果表明普泰的试剂盒5-7天就能检出gE抗体，早期检测更灵敏；在检测gB方面（免疫效果评价），普泰生物也与BioChek的试剂盒作对比实验，符合率可达到95%。

田克恭表示，业内普遍用gB作抗原来检测免疫保护抗体，后来实验发现，猪伪狂犬变异毒株gB和gC的中和抗体都不是很高，gD的中和效价有20多，gD蛋白是最重要的免疫保护相关性蛋白，更能反应出打苗之后的免疫情况，可以更准确的制定免疫程序。因此，在猪伪狂犬的免疫效果评价方面可以直接检测gD，不检测gB。

移动实验室结果识读并出具检测报告

以往检测猪伪狂犬病毒的gE和gB，需要两种试剂盒，做两次。田克恭介绍，为了省时省力，方便快捷，洛阳中科芯片公司改变原有的检测方式，研发出一种PRV gE/gD抗体联检生物芯片，竞争ELISA原理，一个样品，一次检测，获得两个及以上指标的检测结果。其核心竞争力是采用改性硅胶膜作新型免疫学诊断载体，实现“零背景”，保证特异性；探针三维展示，提高敏感性；多指标检测，实现高通量、自动化操作。检测结果与手机APP相连，读取数值，上传到云端，再生成报告。这种方法既保证了检测精准度与稳定性，与传统的ELISA检测方法相比，效率提高了4-8倍。

现场讲解操作过程

普莱柯在李曼大会现场的展位