一、新闻简讯
2017年11月19日，普莱柯生物工程股份有限公司历时7年研发的国内首个纯病毒样颗粒猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗（大肠杆菌源）——“圆柯欣”上市发布会在广州召开。“猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗（大肠杆菌源）”是普莱柯公司主持承担的河南省重大科技专项《四种新型基因工程动物疫苗研发及产业化》取得的重大科技成果，拥有自主知识产权，已获国家新兽药注册证书。该成果是继7年前普莱柯公司国内首创猪圆环病毒2型灭活疫苗（SH株）以来，通过持续的创新实践取得的又一力作！
7年前，普莱柯公司国内首家研制成功猪圆环病毒2型灭活疫苗（SH株），打破国际市场垄断，填补了国内养殖业长期无国产猪圆环病毒疫苗可用的历史。产品成功上市以来，对我国猪圆环病毒病防控发挥了重大作用，创造了良好的经济效益和社会效益；7年来，公司以国家兽用药品工程技术研究中心为依托，集聚中心超一流研发团队，围绕该疫病防控持续进行研发和工艺技术创新升级，研发更加新型、安全、高效的疫苗。项目团队利用国际前沿的基因工程疫苗技术，与新加坡国立大学生物科学系终身教授袁于人博士合作，成功突破“可溶性蛋白的表达、高纯度Cap蛋白获取、病毒样颗粒组装”三大技术难题，研制成功国内首个真正意义上的纯病毒样颗粒猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗（大肠杆菌源）。该产品的成功研发并上市，对推动行业技术进步及产品升级，提高疫病防控水平具有十分重要的现实意义。
二、项目背景
猪圆环病毒2型（PCV2）能引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道复合体病（PRDC）、母猪繁殖障碍（PRF）、仔猪先天震颤（CT）等一系列疾病，同时易与其他病原混合感染或导致继发感染，增加了临床的复杂性，从而给猪场带来巨大的经济损失，对全球养猪业造成了严重影响。疫苗接种是防控PCV2感染的重要手段。
随着我国生猪养殖集约化程度的不断提高，对猪圆环病毒病疫苗的市场需求持续增加，目前全国猪圆环病毒疫苗销量在15亿元左右。据中国兽药协会《兽药产业发展报告》显示，国内兽用疫苗生产企业在2012年度、2013年度、2014年度、2015年度该产品市场销售额分别为2.74亿元、5.02亿元、5.85亿元、6.75亿元（上述数据均不含进口），年复合增长率为35.06％，呈现快速增长态势。
近年来，基因工程技术正越来越多地应用于疫苗研制领域，该技术主要是借助DNA重组、基因缺失或蛋白表达等基因工程方法对制苗用菌毒株进行构建、改造或亚单位抗原表达，是一项新兴的具有广阔应用前景的高端生物技术。
三、产品优势
与传统的全病毒疫苗相比，猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗兼具体液免疫、细胞免疫等多重免疫功效，并因其不含核酸成分，更加安全、高效：
1、抗原纯、含量高：国内兽用生物制品中第一个采用蛋白质层析技术纯化蛋白，将蛋白纯度做到极致，达到95％以上。通过生物信息学分析，结合基因改造和基因重组克隆技术构建最优菌株，优化发酵和蛋白层析纯化工艺，实现上市产品每头份疫苗中PCV2 Cap蛋白含量在100μg以上。
2、国内首个纯病毒样颗粒圆环亚单位疫苗：类病毒样颗粒就是去除病毒遗传物质之后将重要结构蛋白重新进行装配，结构上仍然具有原病毒特征，但其相对于病毒来说无繁殖能力（也就是无致病力），但仍能使动物机体产生针对该病毒的免疫应答，从而产生抗体使机体对该病毒的感染具有很好的防御能力。圆环病毒病毒样颗粒通过采用独特的病毒样颗粒组装工艺，将5个Cap蛋白组装成一个五聚体，12个五聚体组装成一个VLP（病毒样颗粒），具有比单纯Cap蛋白更优良的免疫原性。通过高分辨率的冷冻电镜解析VLPs结构，可以看到体外组装的VLPs和病毒衣壳表面结构完全一致，形成与天然PCV2病毒相同的形态。
3、专利水性佐剂，使用方便：本疫苗配套研发了国际先进的专利水性佐剂，该佐剂采用胶体高分子交联共聚物为材料制备成纳米微球，微球内部为空间网状结构，具有高效吸附抗原，从而实现长效缓释，并可高效募集免疫细胞的作用。使用该佐剂疫苗通针性好、易注射，免疫后易吸收、副反应小，免疫后7天产生抗体，且免疫持续期超过6个月。
4、一次免疫，全程保护。圆柯欣可实现一头猪一次免疫1ml，实现全程保护！
四、经济和社会效益
普莱柯公司猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗（大肠杆菌源）新药获批，是普莱柯公司持续重视科技创新、加大研发投入的结果，进一步体现了公司的创新实力，同时也推动了行业猪用疫苗产品的升级换代，丰富了公司产品品类，保持了公司在猪圆环病毒疫苗的创新领先地位，并有效提升了公司在行业内的整体竞争力，将为公司带来新的业绩增长点。
猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗（大肠杆菌源）系借助于基因工程技术、用于高效预防PCV2引发相关疾病的新科技产品，该产品上市后，将会加速推动猪用疫苗产业进入基因工程时代，在进一步强化普莱柯在猪苗市场竞争优势的同时，引领我国动物疫苗产业技术进步，为我国家畜疫病防控及安全畜产品生产提供强有力的技术和产品支撑。
附1：研制单位普莱柯生物概况：
普莱柯生物工程股份有限公司主要从事兽用生物制品和药品的研发、生产与经营，系上交所主板上市企业，国家火炬计划重点高新技术企业，国家技术创新示范企业，创新能力与综合实力名列行业前茅。
普莱柯公司始终坚持“创新成就未来”的发展理念，高标准构建两大创新平台。一是经科技部批准依托公司组建的国家兽用药品工程技术研究中心，中心实验室及配套动物中心面积18000多平米，下设动物疫苗、诊断试剂、生物工程、工艺技术、动物药品多个研究所，拥有国家级企业技术中心、动物传染病诊断试剂与疫苗开发国家地方联合工程实验室、博士后工作站、院士工作站和国际一流的研发及配套设施，组建了由世界动物卫生组织高致病性猪蓝耳病参考实验室主任田克恭博士领衔的逾200人的一流研发团队，具备了对重大关键性、基础性和共性产业技术实施系统化、配套化和工程化研究开发的实力。2016年，研发投入占公司销售收入的10％以上，居行业领先水平。二是与新加坡国立大学、中国科学院微生物所、中国动物疫病预防控制中心、军事医学科学院、中国农科院哈兽医研究所等国内外20多家科研机构建立了紧密的产学研战略合作。
公司先后承担国家863计划项目、国家科技支撑计划项目、河南省重大科技专项等国家省市科技项目30余项，获得国家省市科技奖励10余项、其中获得国家科技进步二等奖2项，取得国家级新兽药证书33个，获得国家发明专利授权140余项，其中1项获中国专利优秀奖，建立国家标准55项。先后研制成功了全球第一个禽流感三联、四联疫苗，国内首个猪圆环病毒2型疫苗，为我国兽药产业技术进步、动物疫病防控、畜产品安全提供了强力的技术与产品支撑。
普莱柯坚持以“金牌品质、造福人类”为宗旨，奉行“创新成就未来”的发展理念，恪守“正派稳健经营”的发展战略，发扬“诚信务实、勇创一流”的企业精神，高起点高标准地从事兽用新疫苗和新兽药的研究、生产与推广，致力于打造中国动物保健品行业世界性品牌。
附2：相关概念释义
1、基因工程技术简介
基因工程技术正越来越多地应用于疫苗研制领域，该技术主要是借助DNA重组、基因缺失或蛋白表达等基因工程方法对制苗用菌毒株进行构建、改造或亚单位抗原表达，是一项新兴的具有广阔应用前景的高端生物技术。和传统疫苗相比，基因工程疫苗具有安全、高效、广谱等优势。目前，我国兽用基因工程疫苗市场份额较小，但增长潜力巨大。随着我国畜牧产业转型升级步伐加快，一旦相关技术得以攻破，疫苗品质将大幅提升，市场规模将实现井喷式增长。
2、什么是病毒样颗粒？病毒样颗粒（virus-like particles，VLPs）是由病毒单一或多个结构蛋白自行装配而成的高度结构化蛋白质颗粒，直径大小介于20-150nm，保持了病毒抗原蛋白的天然构象，因而具备激发宿主先天和适应性免疫反应功能。在形态上，VLPs类似未成熟的病毒粒子，但是由于缺乏调节蛋白和感染性核酸，无复制和感染能力。通俗的讲，类病毒样颗粒就是去除病毒遗传物质之后将重要结构蛋白重新进行装配，结构上仍然具有原病毒特征，但其相对于病毒来说无繁殖能力（也就是无致病力），但仍能使动物机体产生针对该病毒的免疫应答，从而产生抗体使机体对该病毒的感染具有很好的防御能力。
3、病毒样颗粒有哪些特点？病毒样颗粒造成的免疫刺激主要包含：第一，由于多价的结构，通过toll样受体和模式识别受体途径刺激先天免疫；第二，诱导机体产生较强的体液免疫；第三，通过MHC I和MHC II类交叉提呈方式增强抗原提呈细胞摄取、加工、提呈。此外，病毒样颗粒还具有纳米材料的如下特征：比如表面积大、可表面吸附具有反应基团的氨基酸（如赖氨酸、谷氨基酸等）、规则的空间结构、以及良好的生物相容性。基于上述特点制备的病毒样颗粒疫苗是亚单位疫苗中具有强免疫原性的一类。
4、什么样的疫苗是亚单位疫苗？亚单位疫苗是指利用物理化学方法提纯病原微生物中具有免疫原性的组分，或者利用基因工程表达该组分，纯化后加入佐剂制成的疫苗。因为在大分子抗原携带的多种特异性的抗原决定簇中，只有少量抗原决定簇对保护性免疫应答起作用。而亚单位疫苗是将病原微生物主要的保护性抗原决定簇存在的组分进行提取、纯化、组装等过程而制成的疫苗。
5、亚单位疫苗的特点有哪些？一是，相对全病毒疫苗来讲，亚单位疫苗无核酸成分，无散毒和毒力返强的风险，安全性更高，稳定性更好；二是抗原组分单一、纯度高，免疫反应性强，接种后可刺激机体产生特异性免疫应答，节约机体免疫资源；三是亚单位疫苗可借助大肠杆菌、杆状病毒、毕赤酵母为载体，可实现规模化生产；四是亚单位疫苗不仅可以产生体液免疫应答，而且组装成VLPs的亚单位疫苗可以诱导机体细胞免疫应答。
6、大肠杆菌表达系统原理：大肠杆菌表达系统是通过DNA重组技术，在大肠杆菌中高效表达编码病原微生物保护性抗原基因的一个表达系统。是目前重组蛋白表达的最常用系统，大肠杆菌表达系统研究的较早，具有背景清楚，操作简便，表达量高等诸多优点。
7、普莱柯为何采用大肠杆菌表达系统？猪圆环病毒2型全基因长为1766-1768 bp，为目前已知感染猪群的最小的病毒之一。圆环病毒表面只存在一种结构蛋白（Cap蛋白），该蛋白不需要任何糖基化位点修饰。此外，大肠杆菌表达系统具有操作简便、周期短，成本低等优点，所以在圆环病毒2型Cap蛋白表达时选择大肠杆菌表达系统更具有竞争力。
普莱柯生物自2010年上市国内首创全病毒猪圆环病毒2型灭活疫苗（SH株）之后，长期致力于更高品质圆环系列产品的研究与开发，即将上市的猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗已突破了可溶性蛋白的表达、高纯度Cap蛋白获取、病毒样颗粒组装三大核心技术，成为国内首个真正意义上的纯病毒样颗粒猪圆环病毒2型疫苗。
